丙泊酚是一種脂溶性的、用于誘導(dǎo)和維持全身麻醉的短效靜脈麻醉劑。1981年阿斯利康公司用大豆油作為載體，研制開發(fā)出脂肪乳劑的丙泊酚注射液，1986年，至今是丙泊酚載體中應(yīng)用廣泛的劑型。影響丙泊酚注射液臨床使用安全性的主要指標(biāo)之一就是粒徑，主要包括平均粒徑和不得檢出的大粒徑[1]。粒徑測(cè)定有2種技術(shù)，第1種為動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)（DLS），第2種為基于米氏散射原理的經(jīng)典光散射技術(shù)。根據(jù)這2種測(cè)定技術(shù)，市面有2種粒度測(cè)定儀，以美國(guó)PSS公司的動(dòng)態(tài)激光粒度測(cè)定儀和英國(guó)馬爾文公司、貝克曼庫(kù)爾特的激光散射粒度測(cè)定儀為代表。由于原理不同，這2種粒度測(cè)定儀測(cè)定結(jié)果存在差異。

在國(guó)內(nèi)丙泊酚注射液的生產(chǎn)企業(yè)中，部分企業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中采用動(dòng)態(tài)光散射法，較嚴(yán)格的限度為：平均粒徑應(yīng)為0.18～0.27μm，90％累計(jì)粒徑不得過0.4μm，大于1μm的乳粒數(shù)不得過2％，并不得檢出大于3μm的乳粒；另一部分企業(yè)照2010年版《中國(guó)藥典》“粒度和粒度分布測(cè)定法”測(cè)定，限度各不相同，主要檢查小于0.4～0.5μm與大于1μm、3μm或5μm的粒子數(shù)。本研究小組承擔(dān)企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的統(tǒng)一工作，在此對(duì)本研究內(nèi)容進(jìn)行總結(jié)。

 2010年版《中國(guó)藥典》（二部）附錄ⅨE“粒度和粒度分布測(cè)定法”即文獻(xiàn)[2]收載的是基于米氏散射原理的光散射法，未收載動(dòng)態(tài)光散射法。所以本研究按《中國(guó)藥典》的方法進(jìn)行丙泊酚注射液乳粒粒徑的測(cè)定，并根據(jù)《中國(guó)藥典》的要求擬定限度。

 由于激光散射粒度測(cè)定儀光學(xué)參數(shù)的設(shè)置與供試品的粒度分布有關(guān)，粒徑小于10μm的微粒（丙泊酚注射液大部分粒子的粒徑在0.4μm以下）對(duì)系統(tǒng)折光率和吸光度的影響較大，必須對(duì)光學(xué)參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化[3]。目前馬爾文激光散射粒度測(cè)定儀的使用面較廣，由于每個(gè)企業(yè)設(shè)置的儀器參數(shù)不一，測(cè)定結(jié)果不同，導(dǎo)致產(chǎn)品質(zhì)量無可比性。現(xiàn)以丙泊酚注射液為模型藥物，考察儀器參數(shù)的設(shè)置情況，以達(dá)到規(guī)范操作的目的，使各企業(yè)產(chǎn)品質(zhì)量具有可比性。

1材料

1.1儀器

 MastersizerMS2000激光散射粒度測(cè)定儀（英國(guó)馬爾文儀器有限公司）；Nicomp380型動(dòng)態(tài)激光粒度測(cè)定儀（美國(guó)PSS公司）。

1.2藥品與試劑

 丙泊酚注射液（來自德國(guó)貝朗制藥有限公司、華瑞制藥有限公司、四川國(guó)瑞藥業(yè)有限責(zé)任公司、廣東嘉博制藥有限公司、西安力邦制藥有限公司、浙江九旭制藥有限公司共6個(gè)廠家13個(gè)批號(hào)產(chǎn)品，主要規(guī)格10ml∶100mg、20ml∶200mg、50 ml ∶ 500 mg 3種）；水為超純水。

2 方法與結(jié)果
2.1 Mastersizer MS2000儀器參數(shù)的考察
2.1.1 遮光度的選擇。6個(gè)生產(chǎn)廠家各自測(cè)定時(shí)所設(shè)定的遮光度值為5%～20%。本研究考察當(dāng)吸收率和折射率參數(shù)相同的情況下，5%～20%的遮光度值對(duì)乳粒測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生何種影響，5%～20%的任何值是否都是適宜的。
方法∶將馬爾文公司的粒度測(cè)定儀的吸收率設(shè)為0.001，折射率設(shè)為1.52，通過在稀釋液（純水）中滴加丙泊酚注射液，調(diào)節(jié)遮光度分別為4.99%、10.04%、15.11%和20.02%時(shí)，乳粒粒徑測(cè)定結(jié)果見表1。 

表1結(jié)果為∶隨遮光度增加，平均粒徑依次減小，殘差依次增加。殘差是儀器自動(dòng)對(duì)實(shí)際測(cè)定的平均粒徑與理論值的擬合度進(jìn)行的評(píng)價(jià)，殘差值越大說明擬合越差。乳粒測(cè)定項(xiàng)的設(shè)置目的是控制平均粒徑過大，是評(píng)價(jià)工藝是否優(yōu)良的一個(gè)手段。表1中遮光度為15.11%和20.02%時(shí)測(cè)得的平均粒徑偏小（理論值0.2～0.3 μm），不利于對(duì)粒徑的控制。
另，在馬爾文公司的粒度測(cè)定儀的工作指南中關(guān)于遮光度的選擇指南建議∶干法測(cè)定時(shí)將遮光度設(shè)為約5%，測(cè)定粒徑小于3～4 μm的樣品時(shí)將遮光度設(shè)為約10%，測(cè)定大于50 μm的樣品時(shí)將遮光度設(shè)為約15%。而丙泊酚注射液中大部分乳粒的粒徑均在0.4 μm 以下。
根據(jù)試驗(yàn)考察結(jié)果，結(jié)合馬爾文公司的粒度測(cè)定儀的工作指南關(guān)于遮光度的選擇指南中的建議，當(dāng)遮光度設(shè)置為5%～10%的任意值，乳粒粒徑測(cè)定結(jié)果無顯著差異;而遮光度值大于15%時(shí)測(cè)得的平均粒徑偏小，不利于對(duì)粒徑的控制。因此建立的方法中遮光度可選擇范圍設(shè)為5%～10%。

2.1.2 吸收率的選擇。馬爾文公司的粒度測(cè)定儀吸收率的設(shè)置為1×10~"，即0、0.1、0.01、0.001……。6個(gè)生產(chǎn)廠家各自測(cè)定時(shí)所設(shè)定的吸收率值有0、0.001和 0.01。本研究考察當(dāng)在遮光度和折射率參數(shù)相同的情況下，設(shè)置不同的吸收率對(duì)乳粒測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生何種影響，是否0～0.1內(nèi)的任何值都是適宜的。
方法∶將馬爾文公司的粒度測(cè)定儀的折射率設(shè)為1.52，通過在稀釋液（純水）中滴加丙泊酚注射液，調(diào)節(jié)遮光度約為15%，考察吸收率分別為0、0.001、0.01和0.1時(shí)，乳粒粒徑測(cè)定結(jié)果，見表1。即∶吸收率為0、0.001和0.01時(shí)，殘差和平均粒徑無差異;吸收率為0.1時(shí)，殘差遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于5%，說明測(cè)得的平均粒徑嚴(yán)重偏離理論值。因此吸收率可選擇范圍為0～0.01。

2.1.3 折射率的選擇。6個(gè)生產(chǎn)廠家各自測(cè)定時(shí)所設(shè)定的折射率值分別為1.47、1.52和1.57。本研究考察當(dāng)在遮光度和吸收率參數(shù)相同的情況下，設(shè)置不同的折射率對(duì)乳粒粒徑測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生何種影響，是否1.47～1.57內(nèi)的任何折射率值都是適宜的。
方法∶將馬爾文公司的粒度測(cè)定儀的吸收率設(shè)為0.001，通過在稀釋液（純水）中滴加丙泊酚注射液，調(diào)節(jié)遮光度約為15%，考察折射率為1.47、1.52和1.57時(shí)，乳粒粒徑測(cè)定結(jié)果見表1。即∶在遮光度和吸收率不變的情況下，折射率為1.47和1.52時(shí)測(cè)得的平均粒徑和殘差無差異;折射率為1.57時(shí)，平均粒徑過大（>0.3 μm），明顯偏離真實(shí)粒徑。因此折射率可選擇范圍為1.47～1.52。

2.2 樣品測(cè)定
根據(jù)儀器參數(shù)的考察結(jié)果及《中國(guó)藥典》對(duì)乳劑粒度的要求嗎，結(jié)合實(shí)際情況，擬定標(biāo)準(zhǔn)為∶取本品，照粒度和粒度分布測(cè)定法【2010年版《中國(guó)藥典》（二部）附錄ⅨE第三法】檢查（若使用馬爾文公司的粒度測(cè)定儀，建議參數(shù)為吸收率0～0.01，折射率1.47～1.52，遮光度5%～10%），平均粒徑不得過0.4μm，大于1μm的乳粒不得過2%，并不得檢出大于5μm的乳粒。
采用馬爾文公司的粒度測(cè)定儀，設(shè)定遮光度為5%、折射率為1.47、吸收率為0.01，測(cè)定樣品。結(jié)果，平均粒徑為0.214～0.335μm，大于1μm和大于5μm的粒子均未檢出。
13批樣品采用經(jīng)典光散射法測(cè)定的粒徑結(jié)果見表2。

2.3動(dòng)態(tài)光散射法與經(jīng)典光散射法測(cè)定結(jié)果比較

前文已述，動(dòng)態(tài)光散射法與經(jīng)典光散射法對(duì)乳粒限度的規(guī)定主要差異在于對(duì)"平均粒徑"及"90%累計(jì)粒徑不得過0.4 μm"的描述。因此用動(dòng)態(tài)光散射法（美國(guó)PSS公司的動(dòng)態(tài)激光粒度測(cè)定儀）及經(jīng)典光散射法（英國(guó)馬爾文公司的激光粒度測(cè)定儀）分別測(cè)定各企業(yè)樣品，對(duì)這2項(xiàng)結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果顯示動(dòng)態(tài)光散射法測(cè)得的平均粒徑普遍小于經(jīng)典光散射法測(cè)得的結(jié)果，測(cè)得的小于0.4 μm粒子的百分比普遍大于經(jīng)典光散射法測(cè)得的結(jié)果，詳見表3。

 3 討論
（1）《美國(guó)藥典》35版"附錄<729>項(xiàng)收載了粒徑測(cè)定的2 種光散射技術(shù)，即DLS和基于米氏散射原理的經(jīng)典光散射技術(shù)，并說明這2種技術(shù)都可以使用，能獲得可接受的結(jié)果。筆者經(jīng)過對(duì)這2種技術(shù)測(cè)定結(jié)果的比較，發(fā)現(xiàn)測(cè)得的平均粒徑及小于0.4 μm的粒子的百分?jǐn)?shù)有較大差異。因此，采用不同的測(cè)定原理，可能要設(shè)置不同的限度。因此，統(tǒng)一藥品標(biāo)準(zhǔn)，明確乳粒測(cè)定的方法、統(tǒng)一限度，才能使各生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品具有可比性。
（2）目前，即使同樣使用經(jīng)典光散射技術(shù)的馬爾文公司的激光粒度測(cè)定儀，由于各企業(yè)設(shè)置的儀器參數(shù)不同，可致測(cè)定結(jié)果不同，導(dǎo)致產(chǎn)品質(zhì)量無可比性。為了甄別哪些參數(shù)的差異會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響，哪些參數(shù)的差異不會(huì)對(duì)結(jié)果造成影響，或者多大的差異才會(huì)影響結(jié)果，本次研究對(duì)3個(gè)主要的儀器參數(shù)進(jìn)行了考察。終確定了儀器參數(shù)的范圍為∶遮光度5%～10%、折射率1.47～1.52、吸收率0～0.01。在此范圍內(nèi)的參數(shù)設(shè)置，對(duì)測(cè)定結(jié)果無影響。
（3）本研究以丙泊酚注射液為示范，對(duì)乳粒粒徑測(cè)定的方法及儀器參數(shù)的設(shè)置進(jìn)行了初步探討，為今后研究類似品種如脂肪乳注射液及中長(zhǎng)鏈脂肪乳注射液等的乳粒粒徑測(cè)定提供了研究方向及思路。參考文獻(xiàn)
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（收稿日期∶2013-01-23 修回日期∶2013-03-26）